Cấu tạo nguyên lý hoạt động của kính hiển vi huỳnh quang soi ngược

Sơ đồ cắt rời của kính hiển vi huỳnh quang Olympus IX70

Kính hiển vi có khung kiểu đảo ngược được thiết kế chủ yếu cho các ứng dụng nuôi cấy mô và có khả năng tạo ra ánh sáng huỳnh quang thông qua đường dẫn episcopic và quang học. Đèn epi-illuminator thường bao gồm một bóng đèn thủy ngân hoặc xenon (hoặc hệ thống laser) được đặt trong một cổng ở phía sau khung kính hiển vi.

Ánh sáng huỳnh quang từ đèn hồ quang đi qua một thấu kính thu và vào một khối lập phương chứa một bộ lọc giao thoa, bao gồm gương lưỡng sắc, bộ lọc chắn và bộ lọc kích thích. Ánh sáng phản xạ từ gương lưỡng sắc bị hạn chế về bước sóng bởi bộ lọc kích thích và đi vào vật kính (bây giờ hoạt động như một tụ điện) để tắm mẫu vật bằng một hình nón chiếu sáng có kích thước và hình dạng được xác định bởi khẩu độ số của vật kính.

Huỳnh quang thứ cấp, do mẫu vật phát ra, quay trở lại qua vật kính, gương lưỡng sắc và bộ lọc chắn trước khi được định tuyến qua hệ thống quang học của kính hiển vi.

Kính hiển vi được trình bày ở trên có một ống quan sát ba mắt được trang bị một cổng và ống mở rộng để gắn hệ thống camera truyền thống hoặc CCD (minh họa một camera CCD làm mát bằng Peltier). Một cổng khác, nằm gần đế ở phía trước kính hiển vi, cũng có thể dùng làm điểm gắn cho hệ thống camera (một camera 35 mm thông thường được hiển thị trong hình).

Trong hình trình bày ở trên, ánh sáng huỳnh quang phổ rộng được lọc để tạo ra một băng thông hẹp của các bước sóng kích thích màu xanh lá cây, có khả năng kích thích các chất huỳnh quang cụ thể trong mẫu vật. Huỳnh quang thứ cấp (ánh sáng đỏ) đi qua vật kính và được phân phối khắp hệ thống quang học của kính hiển vi.

Chiếu sáng truyền qua được cung cấp bởi một đèn halogen vonfram được đặt trên trụ kính hiển vi, phía trên bệ kính. Ánh sáng từ đèn đi qua một thấu kính thu, một loạt các bộ lọc và màng chắn trường trước khi đi vào khẩu độ phía trước của tụ quang. Sau khi được hội tụ bởi các thành phần thấu kính tụ quang, ánh sáng truyền qua được chiếu lên mẫu vật, mẫu vật được đặt trên bệ kính. Ánh sáng bị nhiễu xạ, khúc xạ và không bị mẫu vật hấp thụ tiếp tục đi qua vật kính và vào hệ thống quang học của kính hiển vi, nơi nó có thể được hướng đến thị kính hoặc hệ thống camera.